Mikä on endotoksiinitesti?

Mikä on endotoksiinitesti?

Endotoksiinit ovat hydrofobisia molekyylejä, jotka ovat osa lipopolysakkaridikompleksia, joka muodostaa suurimman osan gramnegatiivisten bakteerien ulkokalvosta.Ne vapautuvat, kun bakteerit kuolevat ja niiden ulkokalvot hajoavat.Endotoksiinien katsotaan olevan pyrogeenisen vasteen tärkeimpiä tekijöitä.Pyrogeeneillä saastuttamat parenteraaliset tuotteet voivat johtaa kuumeen kehittymiseen, tulehdusvasteen induktioon, sokkiin, elinten vajaatoimintaan ja kuolemaan ihmisillä.

Endotoksiinitesti on testi, jolla havaitaan tai määritetään gramnegatiivisten bakteerien endotoksiinit.

Kaneja käytetään ensin havaitsemaan ja määrittämään endotoksiinit farmaseuttisissa tuotteissa.USP:n mukaan RPT sisältää lämpötilan nousun tai kuumeen seurannan lääkkeen suonensisäisen injektion jälkeen kaneihin.Ja 21 CFR 610.13(b) vaatii kanin pyrogeenitestin tietyille biologisille tuotteille.

1960-luvulla Fredrick Bang ja Jack Levin havaitsivat, että hevosenkenkäravun amebosyytit hyytyvät endotoksiinien läsnä ollessa.TheLimulus Amebocyte -lysaatti(tai Tachypleus Amebocyte Lysate) kehitettiin vastaavasti korvaamaan useimmat RPT:t.USP:ssä LAL-testiä kutsutaan bakteeriendotoksiinitestiksi (BET).Ja BET voidaan tehdä käyttämällä kolmea tekniikkaa: 1) geeli-hyytymistekniikka;2) turbidimetrinen tekniikka;3) kromogeeninen tekniikka.LAL-testin vaatimukset sisältävät optimaalisen pH:n, ionivahvuuden, lämpötilan ja inkubointiajan.

RPT:hen verrattuna BET on nopea ja tehokas.BET ei kuitenkaan voinut korvata RPT:tä kokonaan.Koska tekijät voivat häiritä LAL-määritystä, eikä se pysty havaitsemaan ei-endotoksiinipyrogeenejä.