Kromogeeninen tekniikka on yksi kolmesta tekniikasta, jotka sisältävät myös geelihyytymistekniikan ja turbidimetrisen tekniikan endotoksiinien havaitsemiseksi tai kvantifioimiseksi gramnegatiivisista bakteereista käyttämällä hevosenkenkäravun (Limulus polyphemus tai Tachypleus tridentatus) sinisestä verestä uutettua amoebosyyttilysaattia.Se voidaan luokitella päätepistekromogeeniseksi määritykseksi tai kineettis-kromogeeniseksi määritykseksi tietyn käytetyn määritysperiaatteen perusteella.
Reaktion periaate on seuraava: amebosyyttilysaatti sisältää sarjan seriiniproteaasientsyymejä (proentsyymejä), jotka bakteerien endotoksiinit voivat aktivoida.Endotoksiinit aktivoivat proentsyymit tuottamaan aktivoituneita entsyymejä (kutsutaan koagulaasiksi), jälkimmäinen katalysoi värittömän substraatin halkeamista vapauttaen keltaisen värillisen tuotteen pNA:ta.Vapautunut pNA voidaan mitata fotometrisesti 405 nm:ssä.Ja absorbanssi korreloi positiivisesti endotoksiinipitoisuuden kanssa, jolloin endotoksiinipitoisuus voidaan kvantifioida vastaavasti.
Postitusaika: 29.9.2019
